实训十一 胚和种子培养
(一) 实训目的
熟练掌握胚和种子培养环节中取材、灭菌、接种过程,培养
与对策,以及驯化管理技术。
(二)实训时间 春秋两季
(三)实训材料
桃胚或种子,大豆胚或种子
(四)实训场地 组培实验室和驯化温室
(五)实训内容
1. 外植体选取、灭菌和接种
2. 培养与对策
3. 驯化管理
(六)实训步骤
1.外植体选取、灭菌和接种
选择桃种子的成熟胚,因其在果皮内,消毒简便,将种子用70%
酒精进行几秒钟的表面消毒,再用无菌水冲洗3-4次,然后在无
菌条件下的进行解剖,取出胚接种在培养基上即可。超产奖励
基可只含无机大量元素和糖,可将糖浓度提高至10%以上。
2.培养及观察
胚培养由于有胚性分生组织存在容易生长和分化,若时采取茎
段扩繁,只要能长出枝条即可,若是用芽丛扩繁,须用分化培
养基,前者容易,后者困难,诱导芽丛时,应用叶腋处分化出3
个以上小芽为佳,随着继代次数增加,分化率也越来越高。
(七)实训思考和作业
1. 胚胎接种须考虑极性方向吗?为什么?
2. 为什么生出茎段容易扩繁,而生出芽丛较难?
3. 写出胚胎分化时生长过程。
实训十二 菊花的快繁
(一)实训目的 熟练掌握菊花组织培养中,外植体选取、接种、
培养观察以及驯化管理技术。
(二)实训时间 春秋两季均可
(三)实训材料 菊花植株(有花)
(四)实训内容
1. 外植体的选取、灭菌和接种
2. 培养
3. 驯化
(五)实训步骤
1.外植体的选取灭菌和接种
外植体可选取茎段、茎尖、叶片、花序梗、花器等,一般选用茎段,
其次是花器。选择茎段时取无病虫害,粗壮健康的枝条,叶茂茎粗
较好,选择花器时,选择含苞未放,以便于灭菌。但不要过分幼嫩,
因容易受药害。
茎段可用酒精---升汞---无菌水三步处理后切割成单茎段,接入
培养基,培养基选用一般分化培养培养基;而花器可简化灭菌过程,
只用酒精处理即可,若取花瓣,将其切成0.5厘米见方的大小,象叶
块那样,放入培养基,培养茎可选用诱导培养基。
培养条件为22-28℃,光强1000-4000Lx,每天12-16小时为宜。
2.培养
继代培养时,取茎段者可由切割茎段法扩繁比较简单。取花器者,
须诱导出芽,再由芽生出芽丛或枝条,前者由分离芽来扩繁,后者
可用切割茎段法扩繁。其中以切割茎段繁采用MS0培养基,以分离芽
丛扩繁采用分化培养基。
生根过程和驯化过程参照实训一进行。
(六)实训思考和作业
1. 菊花快繁时你待批哪种外植体?观察接种后的生长分化情况。
2. 写出菊花快繁的实训报告 。 |