实训九 微茎尖脱毒培养
一　实训目的
熟练掌握微茎尖培养的各个技术环节，包括外植体选取、
灭菌、接种，培养观察与对策等。
(二)实训时间 春或早秋两季。
(三)实训材料 菊花茎尖或香石竹茎尖
(四)实训场所 组培实验室
(五)实训内容
1.微茎尖选取、消毒、剥离、接种。
2.培养观察。
(六)实训与步骤。
1.外植体选取、灭菌、剥离和接种。
对选取的茎法可简单灭菌，如用酒精棉球擦拭，但为谨慎
起见，也可进行表面消毒，如用0.1%次氯酸钠表面消毒10分钟。
在超净台下，将茎尖切成1.5厘米长，下端约1.0厘米长留作
手拿部分。先用肉眼剥离外面的幼叶，至0.5厘米大小时，
再移至解剖镜下，用手或镊子夹住茎部，用解剖针轻轻剥
掉幼叶和叶原基，解剖针可蘸少许酒精，过火灭菌，但要
注意解剖针的冷却，当剥到看见一个闪亮半圆球的顶端分
生组织点，外缘只剩两枚幼叶原基时，可用叨将微茎尖切
下来，然后接到培养基中，注意随切随接，防止变干变褐。
培养基选用MS0+BA2+NAA0.2每瓶接入1-2枚微茎尖，共接5瓶。
2.培养观察
微茎尖培养须经历浸长的时间，一般要持续2个月以上才能见
到微茎尖的分化，一般由茎尖直接分化出芽丛。
(七)实训思考题和作业
1. 微茎尖剥离时会出现什么问题？你怎么解决？
2. 微茎尖培养时会有什么变化？
3. 写出微茎尖培养的实训报告。