2.3 培养条件
2.3.1温度 temperature
指标:大多数组织培养都是在23-27℃之间进行,
一般采用25±2℃。
低于15℃时培养,组织会表现生长停止,高于35℃时
对生长不利。
作用:温度不仅影响组培苗的生长速度, 也影响其分化
增殖以及器官建成等发育进程。
差异:不同植物培养的适温不同。百合的最适温度是20℃、
月季是25-27℃、番茄是28℃。 不同培养目标采用的培养
温度也不同, 百合鳞片在30℃下再生的小鳞茎的发叶速度
和百分率都比在25℃下的高。用35℃处理草莓的茎尖分生
组织3-5天,可得到无病毒苗。
2.3.2光照 light
组织培养中光照也是重要的条件之一, 主要表现在光强、
光质、以及光照时间方面:
1) 光照强度light intensity 光照强度对培养细胞
的增殖和器官的分化有重要影响, 从目前的研究情况看,
光照强度对外植体、细胞的最初分裂有明显的影响。 一般来说,
光照强度较强,幼苗生长的粗壮,而光照强度较弱幼苗容易徒长。
2)光质 light wave
光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都
有明显的影响。 如百合珠芽在红光下培养,8周后,分化出
愈伤组织。但在蓝光下, 几周后才出现愈伤组织,而唐菖蒲子
球块接种15d后,在蓝光下培养首先出现芽,形成的幼苗生长
旺盛,而白光下幼苗纤细。
3)光周期 light period
试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养, 最常
用的周期是16h的光照, 8h的黑暗,研究表明,对短日照敏
感的品种的器官组织, 在短日照下易分化,而在长日照下产
生愈伤组织,有时需要暗培养, 尤其是一些植物的愈伤组织
在暗下比在光下更好。如红花、乌饭树的愈伤组织。
2.3.3湿度humity
湿度的影响包括培养容器保持和环境的湿度条件, 容器内
主要受培养基水分含量和封口材料的影响。 前者又受琼脂含量
的影响。在冬季应适当减少琼脂用量, 否则,将使培养基干硬,
以致不利于外植体接触或插进培养基, 导致生长发育受阻。封口
材料直接影响容器内湿度情况,但封闭性较高的封口材料易引起透
气性受阻,也导致生长发育受影响。
环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发, 一般要求70-80%
的相对湿度, 常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。湿度过低会
使培养基丧失大量水分,导致培养基各种成分浓度的改变和渗透压的
升高,进而影响组织培养的正常进行;过高时,易引起棉塞长霉,
造成污染。
2.3.4渗透压penetrating pressure
培养基中添加的盐类、 蔗糖、甘露醇及聚乙二醇类高分子化合物,
影响到渗透压的变化。 1~2个大气压对生长有促进作用,2个大
气压以上就对生长有阻碍作用, 5~6个大气压生长就完全停止,
6个大气压细胞就不能生存。
2.3.5 pH值
不同的植物对培养基最适pH值的要求也是不同的(表2-1),
大多在5~6.5左右,一般培养基皆要求5.8,这基本能适应大多
植物培养的需要。

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
COPYRIGHT (C) 2006-2008, 宁波职业技术学院, ALL RIGHT RESERVED