=

11= 　水果类的组 = 455;培养　

目的要求：

1= ．掌握&= #33609;莓茎尖脱毒培养的= 968;般操作步骤

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>2．初步&= #25484;握鉴定草莓无病毒!= 495;的方法

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>3．一般&= #25484;握苹果组织培养的= 867;型

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>4．掌握&= #33529;果茎尖培养的主要= 615;节

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>5．一般&= #25484;握草莓花粉培养的= 823;致步骤

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>6．一般&= #25484;握苹果的整形修剪= 216;术

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>7．掌握&= #33889;萄茎尖培养各步骤= 340;主要变化和原因

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>8．掌握&= #26080;花果茎尖培养各阶= 573;培养基组成

11．1 草莓组织培养

　　　　　= ;　11．1．1　草莓的形态特&#= 24449;和生物学特性

草莓（Fragaria　spp．）为重要的浆果植= ;物，栽培分布很广ᦁ= 2;其总产量在浆果类中&= #20165;次于葡萄，居世界= 532;二位。草莓果实柔软= ;多汁，含丰富的糖、&#= 37240;、矿物质，维生素Ļ= 61;。草莓可鲜食，ߖ= 3;可加工成果酱，果酒&= #31561;。其颜色鲜艳，是!= 391;好的配餐食品。

草莓繁殖容易，= ;结果早，收效快。尤&#= 20854;是近年的促成栽培ʌ= 92;利用塑料大棚、日光= 温室，使草莓的成熟= 6399;大大缩短，从每年௚= 0;11月份到次年的6月份，都有新ྩ= 2;草莓上市，填补了水&= #26524;的淡季市场。

（1<= /span>）形态特征　草莓ì= 46;多年生草本植物，植株矮小，呈ࡔ= 2;平卧丛状生长，根系&= #20026;须根系，在土壤中= 998;布较浅。草莓的茎呈= ;短缩状，分地上和地&#= 19979;部分，地上短缩茎Ŏ= 10;间极短，节密集，其= 上密集轮生叶片，叶= 3099;部位着生腋芽。地ߍ= 9;短缩茎为多年生，是贮存营养物ฝ= 6;的器官，也可发育成&= #19981;定根。匍匐茎是草!= 683;的特殊地上茎，是其营养繁殖ࢤ= 0;官，茎细，节间长，&= #19968;般座果后期发生。叶属于基生三࠲= 6;复叶，呈螺旋状排列&= #65292;在当年生新茎上总= 494;柄部与新茎连接部分= ;，有两片托叶顶端膨&#= 22823;，圆锥形且肉质化z= 90;离生雄蕊20～35枚。&= #38604;蕊离生，呈螺旋状= 490;列在花托上，数目从= ;60～600不等= 。花序为二歧聚ߩ= 4;花序至多歧聚伞花序&= #12290;果实为假果，主要= 159;花托膨大肉质化形成= ;，瘦果以聚合果形式&#= 29983;于花托上。果实成Ģ= 87;时果肉红色，粉红色= 或白色。

（2<= /span>）生物学特性　草莓根系在土壤温= 4230;达到2℃时开始活动，在10℃时开始形成新根，= 6681;系生长的最适温度ߒ= 6;15～20℃，&#= 31179;季温度降低到7～8℃时= 983;长减弱。春季气温达= ;5℃时植株开始萌芽，!= 550;叶开始生长。草莓是= ;喜光植物，但又比较&#= 32784;荫。光照充足，植Ĥ= 89;生长旺盛，叶片颜色= 深，花芽发育好，能= 3719;得较高的产量。相ࡡ= 3;光照不良，植株生长&= #21183;弱，叶柄及花序柄 = 454;。叶片色浅，花朵小= ;，果实小，着色不良&#= 12290;草莓的根系分布较ė= 73;，加上植株矮小，而= 叶片则较大，因此蒸= 1457;量大。在整个生长ण= 5;节，叶片几乎都在不&= #26029;地进行老叶死亡、= 032;叶发生的过程，叶片= ;更新频繁。这些特点&#= 65292;决定了草莓对水分Š= 01;求较高。但在不同的= 生长发育时期，对水= 0998;的要求不同。开花੏= 9;土壤的含水量应不低&= #20110;最大田间持水量的70%。果实膨大及= 104;熟期土壤含水量应不= ;低于80%，而秋季9= 、10月份，土壤持ĕ= 00;量达60%即可，草莓不 = 784;涝，要求土壤既有充= ;足的水分供应，又要&#= 26377;良好的通气条件。Ő= 09;莓对土壤适应性强，= 在各种土壤上都能生= 8271;。但由于是浅根性߯= 6;物，要求肥沃、疏松&= #12289;透水、通气的中性= 289;微酸性或微碱性土壤= ;。

11．1<= /span>．2　栽培方法

在自然条件下，= ;草莓用匍匐茎分株法&#= 32321;殖,这种方法繁殖౿= 5;数高，保持了母本的&= #20248;良性状。在繁殖圃#= 774;1mê= 85;行距，50～60cm株距= ;定植，从5月到9月= 2343;可繁殖。圃内保证ೝ= 3;水供应，保持土壤湿&= #28070;、疏松，减少结果%= 327;。匍匐茎发生后ᦁ= 2;将其向母株四周拉开&= #65292;排列均匀，并在偶= 968;节上压土促发根系，= ;每条匍匐茎上可形成3～5个壮= 3454;的子幼苗，待茎苗໳= 1;到3～4片叶= 6102;可以移出，作为定ઁ= 3;苗用。移出时每株小&= #33495;靠母株一侧的匍匐!= 550;留2cm= 8271;剪断，另一侧齐根࠽= 8;断。起出的苗可进行&= #20551;植，假植宽度以15×15cm为宜，假= 6893;深度以根和叶柄分஺= 8;线埋入土壤1cm= 0026;宜，假植后要做好౜= 9;理工作。

11．1．3　草莓的脱= ;毒苗培养

（1）热处理脱= ;毒

将草莓植株= ;在40～41℃温度下处= 理4～6周，然后取= ;微茎尖培养。

（2<= /span>）微茎尖脱毒

①初代培养　取= 草莓生长健壮的母株= 5110;匍匐茎上的顶芽，ஷ= 2;自来水流水冲洗2～4h，然&#= 21518;剥去外层叶片，在Ą= 80;菌条件下，用0.5%次氯酸钠溶液= 4920;面消毒5min，并不停地搅= 1160;促进药液的渗透。ࢷ= 2;无菌条件和解剖显微&= #38236;下剥取茎尖分生组 = 455;，以带有1个叶原基的茎व= 4;为好。0.2mm&= #30340;茎尖无病毒率可达= 040;100%，但接种后的= 5104;活率下降，并延长࣌= 1;养时间。茎尖分离后&= #65292;迅速接入培养基MS+BA_0.25+NAA_0.25或White+IAA_0.1中。培养= 条件为22～25℃，&#= 26085;照16～18h/d，ࠠ= 9;强3000Lx。经2ᦉ= 4;3个月的培养，ࡤ= 7;生长分化出芽丛，一&= #33324;每簇芽丛含20～30个小&= #33469;为适。注意在低温= 644;短日照下，茎尖有可= ;能进入休眠，所以较&#= 39640;的温度和充足的光Ģ= 31;时间必须保证。

②继代培养　把= 芽丛割成芽丛小块，= 6716;入MS培养基中，令Ð= 54;长大，以利分株，待= 苗长大到1～2cm时，&= #21487;将芽丛小块分成单= 666;，再转入前述的分化= ;培养基中，又会重复&#= 19978;述过程，达到扩大Ń= 21;殖的目的。

③生根培养　在= 培养基中加入NAA 1mg/L或IBA 1mg/L= 5292;使发根整齐，ஸ= 1;于草莓地下部分生长&= #21152;快，发根力较强，= 063;可将具有两片以上正= ;常叶的新茎从试管中&#= 21462;出进行试管外生根z= 90;

④驯化　用镊子= 把草莓苗从试管瓶中= 1462;出，洗掉根系附带௚= 0;琼脂培养基。事先备好8×8cm= 5110;6×6cm的塑料营养&= #38069;，内装等量的腐殖= 303;和河砂。栽前压实，= ;浇透水，用竹签在钵&#= 20013;央打一小孔，将试ļ= 49;苗插入其中，压实苗= 基部周围基质，栽后= 6731;浇薄水，以利幼苗࣌= 2;部和基质密合。

栽后的试管苗要= ;培养在湿度较大的空&#= 38388;内，一般加设小拱੼= 2;保湿，并经常浇水，&= #20197;增加棚内湿度，以#= 265;到塑料薄膜内表面分= ;布均匀的小水珠为宜&#= 12290;约过7～10d 后。当检查有= 9968;定的根系生出，可๨= 0;渐降低湿度和土壤含&= #27700;量，进入正常幼苗= 340;生长发育管理阶段。= ;

11．1．4　花药(Pollen)培养<= /span>

花药培Ð= 59;操作简单，因经愈伤组织๨= 4;径，再分化得到的即&= #20026;无病毒苗，所以可= 813;去病毒鉴定工作。

（1<= /span>）取材与培养

取花粉发育单核= ;期的花蕾，置于洁净&#= 22521;养皿中，内放一层ě= 88;纸，滴蒸馏水数滴保= 湿。将处理放入3～4℃冰= 665;中低温保存3～4d。经&#= 39044;处理的花蕾先在70%酒精中浸泡半= 998;钟，取出放入新配制= ;的饱和漂白粉上清液&#= 20013;消毒10min，用无菌水冲&#= 20924;3次。然后在超ࠬ= 8;工作台上剥取花药，&= #31435;即接种。花粉发育= 102;期可采用醋酸洋红压= ;片签定，培养基为MS+2.4－D_0.4 +IAA<= sub>2。去分化阶段培&= #20859;条件为24～26℃，10h/d,1500Lx，20dࡧ= 8;可产生乳白色的愈伤&= #32452;织。

（2<= /span>）植株分化

将诱导出的花药= ;愈伤组织转移至1/2 MS基本培养基中&= #65292;添加GA 0.5，BA 0.5和&= #19977;十烷醇4mg/L。愈伤组织经&#= 22521;养后很快转绿，以×= 18;微带淡紫红色，15d后在表面分化= 0986;半球形小突起，转ߒ= 6;绿色。20天后分化出幼Ö= 94;、幼茎，并有不少突= 起物，以后陆续分化= 0986;新梢。

11．1<= /span>．5 草= ;莓无病毒苗的鉴定Identification

草莓花药培养得= ;到的为无病毒苗，而用生长点培ࠥ= 9;得到的植株，则必须&= #32463;过病毒鉴定，确定= 854;不带病毒，才可以大= ;量繁殖，用于生产。

（1<= /span>）草莓病毒的种类

草莓病毒主要有= ;四种，为斑驳病毒，&#= 30385;叶病毒，脉结病毒Ø= 44;轻型黄边病毒。斑驳= 病毒在EMC指示植物上表= 616;不整齐的黄色小斑点= ;；皱叶病毒在指示植&#= 29289;UC—1上产= 9983;不整齐的小斑点，ߣ= 7;及不整齐的叶脉，叶&= #26564;暗褐色；脉结病毒= 312;指示植物EMC上表现小叶向= 518;反转成风车状，尖端= ;卷曲，叶脉成带状褪&#= 32511;；轻型黄边病毒在EMC指示植物产生 = 418;叶，数日即枯。

（2）草!= 683;病毒的鉴定方法

因草莓的病毒在= ;通过汁液接种时不感&#= 26579;，所以通常采用小Ö= 94;嫁接法来进行鉴定。=

首先从被鉴定的= ;草莓上采集长成不久&#= 30340;新叶，除去两边的ë= 67;叶，中央的小叶带1～1.5cm的叶柄，把它削成楔形߯= 6;接穗。而指示植物则&= #38500;去中间的小叶，在= 494;柄的中央用刀切入1～1.5cm，再插入ÿ= 09;穗，用线把接合部位= 包扎好。为了防止干= 9157;，在接合部位涂上ऴ= 9;量的凡士林。为保证成活，ࢷ= 2;二周内，可罩上塑料&= #34955;，置于半见光的场= 152;。约经两周时间，撤= ;去塑料袋。若带有病&#= 27602;，嫁接后1～2个月= 5292;在新展开的叶、匍ࡎ= 4;茎或老叶上会出现病&= #30151;。

11．1<= /span>．6　草莓无病毒Ŏ= 95;的繁殖和利用(Propagation and Utilization)

（1）防= 490;蚜虫的危害

草莓无病毒苗的= ;繁殖重要的是要防止&#= 26080;病毒苗的再度污染z= 90;由于草莓病毒ߒ= 7;要是蚜虫传播的，所以要搞好防൶= 0;虫工作。传播草莓病&= #27602;的主要有草莓茎蚜= 289;桃蚜和棉蚜。其中分= ;布最广泛的是草莓茎&#= 34460;，茎蚜的身体着生ć= 77;钉状的毛，可以寄生= 在寄主的全株各个部= 0301;上。一草一木防治ਲ= 2;可使用马拉松乳剂，&= #27687;化乐果乳剂等接触= 432;虫剂，防治期在5～6月和9～10月，&#= 29305;别是9～10月一&#= 27425;，可防止蚜虫的越Ñ= 08;。

为保证种苗的无= ;病毒，在原种种苗生&#= 20135;阶段，应在隔离网ê= 60;中进行。传播草莓病= 毒的蚜虫较小，可以= 6890;过大于1mm= 2593;眼，故应采用0.4～0.5mm大小的规Ċ= 84;，其中以300号防虫网为好= 290;

（2）繁= 542;程序及提高繁殖率的= ;措施

草莓无毒苗的繁= ;殖程序可分五步，包&#= 25324;病毒鉴定生产出无Ĕ= 02;苗、原种种苗培养、= 原种种苗繁殖、良种= 1181;苗繁殖，生产用苗ಠ= 1;殖和栽培苗繁殖，前&= #22235;步在隔离室中进行A= 292;后一步露地进行。为= ;提高无病毒母株的繁&#= 27542;株数可采用赤霉素ã= 88;理和摘蕾的方法。赤= 霉素处理用5ppm的浓度，每株5ml，在5月&= #19978;旬和6月上旬分两次๢= 7;行。摘蕾可减轻母株&= #30340;营养负担，促使匍= 264;茎的大量发生，田间= ;地每一株可繁殖150～200株。= ;

（3）生= 135;管理工作

母株必须保证每= ;株有大于3.3m²的营养面积。再是&= #27880;意匍匐茎排列位置A= 292;不要交错重叠，不利= ;采苗，采苗也要适时&#= 36827;行。无论秋季或春é= 95;种植，繁殖床必须要๢= 7;行土壤消毒，小面积&= #21487;用蒸气剂料混合消= 602;，可防治草莓萎缩病= ;、根腐病、萎凋病等&#= 30340;发生。

隔离繁殖圃通常= ;施缓效性肥料，每公&#= 20137;用3t肥；为促使匍Ô= 64;茎发生，要经常灌水= 。

=

11= 水果类的组 = 455;培养

目的要求：

1= ．掌握&= #33609;莓茎尖脱毒培养的= 968;般操作步骤

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>2．初步&= #25484;握鉴定草莓无病毒!= 495;的方法

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>3．一般&= #25484;握苹果组织培养的= 867;型

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>4．掌握&= #33529;果茎尖培养的主要= 615;节

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>5．一般&= #25484;握草莓花粉培养的= 823;致步骤

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>6．一般&= #25484;握苹果的整形修剪= 216;术

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>7．掌握&= #33889;萄茎尖培养各步骤= 340;主要变化和原因

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>8．掌握&= #26080;花果茎尖培养各阶= 573;培养基组成

11．1 草莓组织培养

11．1．3 草莓的脱= ;毒苗培养

（1）热处理脱= ;毒

将草莓植株= ;在40～41℃温度下处= 理4～6周，然后取= ;微茎尖培养。

11= 　水果类的组 = 455;培养　

1= ．掌握&= #33609;莓茎尖脱毒培养的= 968;般操作步骤

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>3．一般&= #25484;握苹果组织培养的= 867;型

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>4．掌握&= #33529;果茎尖培养的主要= 615;节

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>5．一般&= #25484;握草莓花粉培养的= 823;致步骤

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>6．一般&= #25484;握苹果的整形修剪= 216;术

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>7．掌握&= #33889;萄茎尖培养各步骤= 340;主要变化和原因

<= span lang=3DEN-US style=3D'font-size:10.5pt;mso-bidi-font-size:16.0pt;line-heigh= t:172%; letter-spacing:-1.0pt'>8．掌握&= #26080;花果茎尖培养各阶= 573;培养基组成

11．1．3　草莓的脱= ;毒苗培养